Friday, January 24, 2014

     A.   Tujuan
Mengetahui aktivasi AST dalam saliva

B.  Prinsip
Prinsip mengukur aktivitas aspartat amino transferase
Aspartat amino transferase mengkatalis transfer dari nitrogen yang berasal dari glutamat menjadi oksaloasetat melalui :


Untuk menentukan AST secara kuantitatif, serum direaksikan kedalam buffer  menggunakan ketoglutarat dan aspartat. Hasil dari NADH2 menjadi malat menggunakan MDH (malate dehidrogenase) berdasarkan reaksi :


Kadar NADH2 dapat diukur melalui penurunan absorbansi. Hal ini  secara langsung menunjukan aktivitas AST.

Material :
1.        Buffer – substrat
2.      Solvent

Cara kerja mengukur aktivitas aspartat amino transferase :
Tambahkan solvent kedalam substrat dan campur sebaik mungkin. Setelah terlarut reagent dapat diam selama 30 hari dalam 2-8 C.

Pipette into tube
Sample
Blank
Buffer – substrate
1.0 mL
1.0 mL
Serum
0.1 mL
-
Aquadest
-
0.1mL
Kocok kedalam 37 C, setelah 1 menit ukur absorban pada panjang gelombang 340 nm setiap 3 menit, catat perubahan absorban/minute.

Calculation:
(A3 – A2) + (A2 – A1)     x 1546
          2

Hasil :
Kadar AST:
A1 = 0.187 A2 = 0.182 A3 = 0.169
(A3 – A2) + (A2 – A1)     x 1746
          2
= (0.169 – 0.182) + (0.182 – 0.187)     x 1546
                   2
= 15,174 (normal)

0 komentar:

Post a Comment

Aybsth. Powered by Blogger.